مالیکولي ارثي څېړنې ميتود

وپلټي او په DNA جوړښت کارول مالیکولي جنتيکي طريقه د بېرغونو په ګوته کړي. د هر (DNA) په سیمه کې، چې د کروموزوم، جین یا allele دې سيمه کې د تولید، د میتودونو سره توپير لري. هر مالیکولي جنتيکي طريقه بنياد لري او یا ځینې RNA او DNA د نورو د السوهنې د. دا ټول ميتودونه يو ستر پیچلتیا له خوا خصوصيات دي، پرته له لابراتوار شرايطو څخه بهر نه شي ترسره شي، او د کارکوونکي بايد په لوړه کچه د وړ وي. په څو پړاوونو کې دغه کار ترسره کړي.

پړاوونو کې

لومړی، د RNA او یا DNA د نمونې ته جوړ شي. دلته، یو مالیکولي جنتيکي طريقه کولای شي د هر ډول مواد تقریبا استعمال شي: د وینې، د لوکوسایټونو یو څاڅکی، fibroblasts کلتور، مخاط (شېره)، آن د وېښتو، - د DNA کولای شي له هر ډول نمونه تر لاسه کړل. مناسبه ده، چې د هر ډول مالیکولي جنتيکي میتودونو او د هغوی د بېلابېلو انتخابونو څخه استفاده او د اوږد ګوښه DNA کې زېرمل کيږي کنګل. دوهمه مرحله د وقف د خوښې د ټوټو (amplification) د DNA د راغونډېدنې، دا مرسته کوي (پرته د ژوند اورګانيزم لاس لرلو په نسبت) د polymerase کړۍ غبرګون په نسبت ډاډمن کړي. په پایله کې، د دې کړۍ غبرګون له خوا د DNA د ټوټه ټوټه ټاکل سره ضربوي، او د DNA د زياتوالي د ځلې لفظي میلیونونو اندازه.

په مالیکولي ارثي څېړنې ميتود دریم ګام دی ضرب د DNA محدوديت (دا ټوټه، ټوټه او يا قلمه) راوستله. محدوديت له خوا electrophoresis په يوه polyacrylamide یا agarose ځرګنده ترسره کړ. د DNA د ټوټه ټوټه مطالعه کوم. دا مالیکولي-جنتيکي طريقه اجازه هر چا ته په ځرګنده يو خاص مقام واخلي. وروسته، ځرګنده ده سره ethidium bromide درملنه، د DNA د الزام وړتيا لري، سره د ماورای بنفش رڼا د شعاع، نو ممکنه ده چې ژوي برخي وڅاري. مالیکولي جنتيکي تشخیصیه ميتودونه دي توپیر لري او يو شمېر، خو د دوو ګامونه ټولو عام دي. خو په د DNA د ټوټې په ګوته کړي په موخه، ځرګنده وي کولای شي په نخښه شی، او ګڼ شمېر نورو موجودو طريقو.

ډولونه

د کشف د ميکوباکټېريام تر ټولو مستقیم او پراخه ميتودونه ښايي د پورته مالیکولي جنتيکي (DNA) د زده کړې ميتود شامل دي. د دې اصل دا دی چې، په د د د عامل د DNA د ځانګړو ټوټې د سکن کړۍ مواد په ګوته نظم. مالیکولي جنتيکي تشخیصیه تخنيکونه تر اوسه په توګه د نري رنځ د ناروغيو لکه په رسمیت یو ډیر اغیزمن لاره نه لري. د polymerase کړۍ غبرګون (PCR) په کارولو سره، تاسو کولای شي چې د اصلي DNA به په يو مليونه ځلې د نسخې د شمېر د زياتوالي په معنا ده، هلته به amplification وي، او دا کار به د پايلو د ښودلو. پنځه نوي په سلو کې دی، کوم چې د دې طريقه اصلي ګټه زیات - د حساسيت کچه ډېره لوړه ده.

د د څيړنې په مالیکولي-جنتيکي د حاصل د څو نسخو د اغيزمنتوب په ميتودونو پاتې لفظي دوه برابره، ځکه چې په دې صورت کې د مسودې نمونه په ګوته کوي د يو ځانګړي oligonucleotide تعاقب ته سل او شپږ ځلې لوړه شوې ده. حتی د د تنفسي سيستم د نري رنځ تشخیص کلتور د پام وړ راښکته خپل حساسيت. دا چې ولې د عصري درملو د ده د د نري رنځ تشخیص مالیکولي جنتيکي ميتودونو په اساس. په ځانګړې توګه کله چې د لوړ antigenic بدلونونو پتوجنونه معامله، معلومه کړي چې د نورو په لاره يو تشريح طريقه موثره ده څومره نور هم ستونزمن - ځانګړې اړتيا لري د غذايي توکيو د رسنيو او د اوږد وخت کرلو. ژونکيميا او مالیکولي جنتيکي ميتودونو پر پايلو اغېز ډېر توپير توليدوي.

د نري رنځ د تشخيص

د نري رنځ د مارشال PCR تشخیص تر ټولو عام ډول د هغو د DNA سلسله چې د دې ناروغۍ د ټولو څلور ډوله ځانګړي کاروي. د دې موخې ته د رسیدو زياتره primers چې کشف تعاقب ده عناصر (is-986، is-6110) وکاروي، لکه د دغو عناصرو په لوړه کچه مهاجرت د نوعو ټوبرکلوسېز په نري رنځ او د تل په جینونو حاضر څو نسخې ځانګړنه ده. هم د DNA د استخراج کولای شي له نورو هر مناسب ميتود سوچه کلتورونو او کلينيکي (د ناروغانو بلغم) ترسره شوي دي. د مثال په توګه، هلته Boom طريقه چې پېښېدلی ډال دی پر بنسټ د guanidine thiocyanate او دکثافتونو د وړونکې د DNA په توګه کارول. د ناروغانو چې توپير وزلو باکتریالوژیکي هر کال زیات، او له همدې امله په کلینیکی عمل تاسیس د سازمان په بشپړ توګه مختلفو کچه شمیر: د DNA مطالعه مالیکولي-جنتيکي طريقه شوی په تشخیص کې ستر رول لوبوي.

که څه هم، موږ باید دا ومني چې دا پرته له ضررونو نه ده. د PCR طريقه ده د زياتره د استعمال راولي د غلط-مثبتې پايلې زيات شمېر، او همدا دليل نه يوازې د تخنيکي غلطيو، بلکې د ميتود په خپله د بڼې دی. برسېره پر دې، د تشخیص د دغه ميتود په کارولو سره چې د ميکوباکټېريام، چې پيژندل شوي پردوام معلوم، دا په ساده توګه ناشونی دی. خو دا تاوان تر ټولو مهمه نه ده. د PCR تشخيصولو مالیکولي جنتيکي ميتودونو د mycobacterial د DNA د ککړتيا د خطر باعث. د دې امله تصدیق اړتیاوې چې د PCR لابراتوارونو انحصاري سخت طرح، دوی درې جلا ودانيو ته اړتيا لري. PCR تکنالوژي ده په عصري او ډیره پیچلې، دا د مناسبو تجهیزاتو او د لوړ روزل شوي پرسونل د کارونې ته اړتیا لري.

bacterioscopy

کله چې د تحلیل تشخیص پايلې بايد د نورو معلوماتو په پرتله شي: کلینیکی معاینه، رافي، میکروسکوپیکې، حاصلاتو او آن د يوه ځانګړي درملنې په ځواب کې ډېر مهم دي. په دې لړ کې، د PCR مطالعاتو يوازې د برخې یو دی. په لومړيو کې تشخيص پاتوجين معلوم شي د ساده او چټکه میتودونه وي - باکتریالوژیکي.

ده رڼا مايکروسکوپ (رنګ Ziehl-Neelsen) او چراغونه (خاکي fluorochromes) کارول. د ګټه ده معاينه د پایلو سرعت. خو د هغې غټ دی حقه له امله لږ حساسيت د محدود ظرفیت ګڼل. که څه هم، له دغه میتود څخه په توګه د ډير اقتصادي او د ځمکې ته د نري رنځ د ناروغانو کشف سپارښت ورکول. د ميکوباکټېريام باکتریالوژیکي میتود کشف وړاندوينه ارزښت او د اټکل له نظره د بکتريا د اطراح لري. ډير زيات باور سره دا مالیکولي د نري رنځ د جنتيکي څيړنې ميتودونه چلند وکړي.

کلتور

د ميکوباکټېريام ښه کشف فرهنګي مطالعاتو پیژني. دپتالوژيکو مواد هم موثر دا هګۍ د منځني جوړ شوی دی: Mordovsky، Finn II، LJ، او داسې نور. د نسبت د درملو او د د د د ميکوباکټېريام د يو شمير د اغیزمنتیا غیر مستقیم شواهدو او د خپلو مستعمرو د ميکوباکټېريام مقاومت معيارونه، که د څیړنې کلتور د استعمال طريقه. د د د د پتالوژيکه موادو د ميکوباکټېريام سرايت انزوا سلنه پر څو چاپیریال ده جوړه زیات کړي.

د ګڼ شمېر فرهنګي، پاتوجين په ګډون وړيا مرسته او د مایعاتو د اړتیاوې پوره کړي. اتومات ميټرونو ډول VANTES ودې په دغه سيسټم کي کارول کيږي او. Crops باید لپاره تر اوو نه تر اتو اوونيو په رشکتو کې ترسره شي. په دغه وخت سره د ودې د نشتوالي نبات کېدای شي منفي پام کې ونیول شي. د تشخیص موادو اخته ګینه کې خوګان، چې د نري رنځ خورا حساس: د ټوبرکلوسېز په نري رنځ کشف تر ټولو اغېزمنه لاره بیولوژیکی نمونو پام کې ونیسي.

ځینې ارقام

د مطالعې په زړه پورې برخه کې، چې له خوا PCR تشخيصولو پرانستل شو چې د محمد د نري رنځ زده کړه - پټو انتانونو. د نري رنځ د اخته عصري مفهوم په ډاګه کوي چې د یو سوه کسان چې په د ميکوباکټېريم توبرکلوسېز په تماس وو، د نوي-ښايي اخته شي، خو یوازې د دوی لس فعال دي ناروغي ده چې جوړ کړي دي. نور رنځ د مصونیت، او ځکه د پېښو نوي په سلو کې د عفونت پاتې انتانونو. یوه بیلګه معلوم نو ځکه يې يوه مالیکولي جنتيکي طريقه مرسته کړې ده.

پاتوړپوهانو وايي، چې پنځوس پنځه د هغو فصلونو پتالوژيکه مواد وو منفي، او د خلکو اخته م- نري رنځ اتیا په سلو کې، خو بهيږي سره د ناروغيو د اکسريز مظاهر نه په سلو کې، PCR مثبت ځوابونه ترلاسه کړ. دا يوه ارثي تشخیصیه میتود د ناروغانو په خوا PCR مطالعاتو د خطر په ګوته کړي، د خپلو تحليلونو (میکروسکوپيکي او کلتور) د پایلو سره مرسته کړې ده شوي منفي، او د عرضي د انتان م- نري رنځ حاضر و.

عصري څېړنې

د ميکوباکټېريام له خوا Griess پرخچه ازمویل نایتریت reductase فعاليت: د روسیې د فدراسیون او باکتریالوژیکي لابراتوارونو د مطلق غلظت د چټکې میتود وکاروي. ، د نري رنځ پر ضد مرکزونه یو میتود دی چې هغه ته اجازه ورکوي چې د مخدره توکو د مقاومت معلوم وکاروي. په مايع رسنيو دا د شیندنی، چې د ميکوباکټېريام radiometric او چراغونه د محاسبې سیستم د ودې اتومات. دغه راز يو تحليل ترسره کيږي په چټکۍ سره - تر دوو اونيو.

اوس مهال، د نوي ميتود په حال کې دي جوړ: د ميکوباکټېريام نشه مقاومت دی په جينوټايپ کچه اندازه کيږي. د د مقاومت جينونه مالیکولي میکانیزمونه او د مطالعې په ميکوباکټېريام د شتون په ګوته کوي. سره د ځانګړو نشه يي توکو د مقاومت دا جينونه تړلي دي. د مثال په توګه، kasA جينونه، inhA، katG ته isoniazid، rpoB جین مقاومت - ګرامه Rifampicin 16Sp RNA جينونه او rpsL - streptomycin، emb1 - د ethambutol، gyrA - یو fluoroquinolone او داسې نور.

ميوټيشن

د عصري تشخیص د پام وړ د DNA د زده کړې د مالیکولي-جنتيکي کچه طريقه لوړه شوې او اجازه لري چې په خپل ټول طیف د اوښتونو په لویه کچه د زده کړو ترسره کړي. اوس موږ پوهېږو چې په 516، 526 او 531 کودونونه تر ټولو معمول ميوټيشن د rpoB جین، او د مختلفو نشه يي توکو د مقاومت په ګوته. د د د د ميکوباکټېريام نه یوازې د دودیز میتودونو په کارولو سره د ټایپنګ میتودونو له یو لړ بشپړو شته - ژونکيميا، بيولوژيکي او فرهنګي، خو هم په پراخه توګه د عصري مالیکولي جنتيکي تخنيکونو کارول. لا کافي دي او د مونوجېنېک ناروغیو د کشف کولو لپاره د صحیح تشخیص طريقه برابر کړي. دوی په د یوه ځانګړي جین کره سيمه DNA د زده کړو پر بنسټ دي. دا یوه پیچلې پروسه معمولا، د وخت ضايع او ګران، خو د ارقامو چې د مالیکولي جنتيکي تحلیل خوا برابر شوي، د نورو ټولو تحلیلونه د ارقامو په پرتله ډير زيات دقيق او معلوماتي دی.

دا د اوږدې مودې په نامه شوي دي، چې د (DNA) نه د اورګانيزم چې دا په هر nucleated حجرو odnakova ده ټول ژوند لپاره د نه بدلون، او د دې دا امکان ته د په بشپړه توګه د بدن د ټولو حجرو د تحلیل وکړي، د ontogeny په هره مرحله کې. د زیانمن جین کولاي شي د پوره کچې کلینیکی ناروغۍ د لومړي اعراض د بڼه، په همدا شان روغ هيتروزايګس خلکو مخکې کشف شي، خو د لرلو په جین بدلون mutation. مالیکولي جنتيکي ميراثي ناروغۍ د تشخیص میتودونو ته اجازه خپل (مستقیم روش، د DNA-تشخيصولو) په ډاګه، او همدارنګه د سره په مارکر loci د DNA (جنتيکي polymorphisms)، چې سره له نږدې یو زیانمن جین (یعنې، د DNA-د تشخيصولو په غیر مستقیم روش) سره تړاو لري د کورنۍ د دغې ناروغۍ د جلاوالی تحلیل. په مستقيمه يا غير مستقيمه توګه - هر ډول د DNA د تشخيصولو ده د يو انسان د DNA په جدي توګه تعريف برخه د تشخيص ميتودونو په اساس.

مستقیم میتودونه

د DNA تشخیص مستقيم ميتودونه دي کله چې مجرم جین ميراثي ناروغي پيژندل شوي، او همدارنګه په نامه او د خپلو ميوټيشن ډولونه. د مثال په توګه، د يو لړ ناروغيو یو مناسب مستقیم میتود. دا Huntington د اټاکسيا (تمدید CTG-تکرارېدې)، او فېنيلکېتون (R408W)، سېسټيک (delF508، ستر ميوټيشن) او داسې نور. د مستقیم میتود اصلي ګټه ده بشپړه دولتي تشخیصیه دقت، او اړتيا نشته چې د د کورنۍ د نورو د DNA په تحلیل کی نشته. که په اړونده جین یو اوښتون دی موندل، دا اجازه دقیقا د وراثت، جينوټايپ هوډ یو تشخیص د په اړخ کې د کورنۍ د نورو برخو لپاره تصویب کړي.

د مستقیم تشخیص بله ګټه ګڼل يوه څخه د خپلوانو او د مور او پلار بد ميوټيشن چې له د ناروغۍ له امله مړ هيتروزايګس وړونکې په ګوته کړي. دا په خاصه توګه ریښتیني د ناروغيو لپاره ارثي مغلوب. د مستقیم ميتودونو زيانونه هم موجود دي. هغوی ته درخواست، تاسو بايد په دې پوه دقیقا د غیر نورمال جین، exon-intron د خپل طیف او د هغې د ميوټيشن جوړښت localize. نه د ټولو مونوجېنېک ناروغيو نن داسې معلومات تر لاسه کړي. Informativeness مستقیم ميتودونو بشپړ نه ګڼل شي، ځکه چې یو او د همدې جین ښايي د پتالوژيکه اوښتون يو زيات شمېر چې د ميراثي ناروغيو د پرمختګ لامل ګرځي لري.

غیرمستقیم میتودونو

په DNA کی د تشخيصولو په نامستقیم ميتودونو په ټولو کارول شوي دي، په نورو مواردو کې، که د زيانمن جین نه دی په ګوته، خو یوازې chromosomally، او یا که د کرښې تشخیص پایله نه ورکوي (دا پېښېږي، که د جین پیچلې مالیکولي سازمان یا یو لوی کچې، که هلته خورا ډیر دي پتالوژيکه ميوټيشن). نامستقیم ميتودونو په allelic کورنۍ د polymorphic نښو جلاوالی تحلیل ترسره کړ. مارکر په همدې chromosomal سیمې او یا ئې په موندل نږدې د ناروغۍ سره تړاو لري او یا د کتلای insertions، ټکی د تعويض په، تکرارېدې استازیتوب کوي، او د هغوی د polymorphism د په بنديز حجرو مختلف مقدار له امله ده.

د غیر مستقیم تشخیص ګڼل microsatellite او minisatellite polymorphisms، چې په پراخه کچه د بشري جینونو وویشل تر ټولو مناسب. دهغوی د ارزښت د معلوماتو په لوړ منځپانګه څرګنده کړه، که ته د جنتيکي واټن د مارکر او د جین تر منځ د زيان ډېر لوی نه دی. او په وروستی صورت کې، د اټکل سموالي د polymorphic مارکر او زيان تر منځ د recombination د فریکونسي تر ډيره حده ټاکل کيږي. نامستقیم تشخیصیه میتود هم د ناروغانو او د ميوټيشن وړونکي په منځ کې د نفوس تحلیل مطالعه allele څپو اجباري لومړني ګام، جمع د د د nonequilibrium او adhesion نښو او تابیع اليل recombination د احتمال په ټاکلو ضرورت برابر کړي.

د نورو ميتودونو

د RNA او یا DNA د لنډ برخو، او همدارنګه د واحد جین مايکروسکوپي مطالعې لاندې visualized کولای شي نه وي، له دې امله، چې د اوښتون د اړتیا له خوا مالیکولي جنتيکي تشخیص په ګوته کړي. د "د بشر د جینونو د پروژې"، همدا شان په مالیکولي جنتيک د نورو پرمختګونه شتون لري ډېر د ميراثي ناروغیو د تشخیص امکان پراخ - دواړه د مخه او د ولادت څخه. دا ميتودونه کولای شي په لومړيو کشف برابر کړي او د وړاندوینې poly- او مونوجېنېک ناروغيو، چې د راروان په ځوانۍ کې ترسره کړي. له بده مرغه، چې د مالیکولي جنتيکي مطالعاتو د تخنیکي وړتیا له امله کله کله د اخلاقي حدود چې ته د ميراث په تړاو جوړ دي څخه پورته وي، په ځانګړې توګه کله چې د تشخيص په ځوانۍ او ماشومتوب دی.

جوړښتي او عددي chromosomal اختالالتو د ناروغۍ او سرطان، او ګڼ شمېر اغېزه د ټولو عام لاملونه دي. Chromosomal aberrations باید په ګوته شي، چې د کورنۍ د مشورې مهمه ده - د وړاندوینه ارزونه، سره په راتلونکي حمل د تناسلي خطر سره. کروموزوم تحلیل دی د جنتيکي تشخیص د "د سرو زرو ستندرد"، خو دا محدود دی. يوازې د ميتودونو مالیکولي جنتيکي تحلیل کولای شي نور ډیر څه، ځکه چې هلته تکنالوژۍ پر بنسټ چراغونه نښې د خپلو لوړ حساسيت توان جنينو ته ځیرک chromosomal بدلونونه چې د کلاسيکې کشف ناشوني دي په ګوته کارول cytogenetic زده کړو. دغه تخنیکونه په زياتيدونکي زموږ د تشخیص وړتیا د پراختیا، کله معاينه، سره د پرمختیايي معلولیت، د ذهني وروسته پاتې، سره د ډېرو نورو ميراثي ناروغيو ماشومان.

د موندنو

دا د بشریت د جین جوړښت او د علم دنده، د بدلونونو ډولونه، د توان په ميراثي توګه هغه ناروغۍ دي چې په کې د مالیکولي جنتيک د پرمختګ سره تړاو رامنځته کشف کړي وو ډېر مهم دی. خپل ميتودونو د DNA په ماليکول کي د مطالعې په موخه دي - او کله چې دا عادي، او کله چې ويجاړ. د د نیوکلیوتایدونو (DNA) deoxyribonucleic اسيد يوه سلسله د تیاري څخه د فرد د ټوټو په ګوته نمونو د ترلاسه کولو په پړاوونو کې غزوي. څخه د حجرو DNA genomic، محدوديت (زړيږي)، amplification (کلوننک)، electrophoresis د ټوټې ګوښه (له خوا agarose ځرګنده خپل برقي چارج او مالیکولي وزن بیلولو). د ځانګړو ټوټې پروت د يو discrete یاتوره سطحه د پيژندنې.

بیا نو د عمل خاص چاڼګرونه، له لارې چې له جنینو د DNA د ټوټو او یا مصنوعی اکټیو راډونو هر ټوټه ټوټه رګه تېرېږي ترلاسه يو کنترول، چې به برابر هر امتحان نمونه وي. که تاسو په پرتله د څېړنو د موقف او یا په اوږدوالي بدلون، که يو نوی ټوټه ټوټه او يا ورک - دا ټول داسې تجويزوي چې د تحليل جین په نیوکلیوتاید تعاقب جوړښت ده. د مالیکولي جنتيکي مطالعاتو اته اساسی تخنیکونو موجود دي: تسلسل (د DNA تعاقب هوډ)، polymerase کړۍ غبرګون (د يوه سلسله د شمیر زیاتوالی)، د primers مشهور جينونه د چمتو کولو، د DNA کلوننک، د recombinant مالیکولونو له امله د recombinant مالیکولونو تولید مشتق پروتين، يوه بشپړه ټولګه د رامنځته کولو (کلکسیون خلاصه کړی) جنینو ټوټې چې د محدوديت په کارولو سره تر لاسه کړل.